Метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) в режиме реального времени – современный высокоэффективный метод качественного и количественного определения нуклеиновых кислот (ДНК/РНК), позволяющий проводить молекулярно-генетическую диагностику и идентификацию генома человека, животных и растений, а также обнаруживать вирусы и бактерии и контролировать эффективность проводимого лечения.
Микрочиповый амплификатор нуклеиновых кислот «АриаДНА» реализует новый формат проведения ПЦР – в микрочипе, который содержит 30 реакторов объемом 1.2 мкл и изготовлен из кремния или алюминия. Оптимизация материала чипа по теплопроводности позволяет сократить время амплификации за счет ускорения нагрева и охлаждения, а небольшой объем реактора – экономить реагенты.
Детекция флуоресцентного сигнала производится в двух диапазонах длин волн. В настоящее время ведется разработка прибора «АриаДНА-4» с регистрацией сигнала в четырех диапазонах.
Особые преимущества «АриаДНА» приобретает при использовании чипов с лиофилизированными тест-системами. В этом случае упрощается постановка ПЦР за счет исключения процедуры работы с реактивами. Оператору необходимо подготовить и ввести пробу в микрореакторы.
Особенности микрочипового амплификатора нуклеиновых кислот «АриаДНА»
- Время проведения ПЦР (45 циклов) — от 20 минут, за счет высокой скорости нагрева/охлаждения образцов (10–12 °С/с);
- Малый расход проб и реагентов;
- Возможность проведения ПЦР-РВ на микрочипе, содержащем лиофилизированные тест-системы, сокращает трудозатраты пользователя;
- Определение ДНК/РНК; проводится одновременно в 30 микрореакторах на двух каналах детектирования (FAM, SYBR Green / ROX);
- Минимизация риска контаминации, проба вводится под слой герметизирующей жидкости;
- Программное обеспечение, удобный пользовательский интерфейс, отображение текущих параметров ПЦР, автоматическая генерация отчетов, экспорт результатов, обеспечение контроля доступа.
Процедура работы:
Полимеразная цепная реакция проводится в микрочипе при термоциклировании по заданному протоколу. Одновременно производится считывание аналитического сигнала, создаваемого ПЦР-продуктами, и вывод информации на экран монитора.
Образцы ДНК/РНК дозируются в микрореакторы чипа, который затем помещается в прибор. С компьютера настраивается протокол термоциклирования и запускается анализ. Дальнейшие действия происходят автоматически.
Области применения:
- Пищевой контроль, производство пищевых продуктов — определение Salmonella и Listeria
- Клиническая диагностика — определение возбудителей ИППП
- Генетическая диагностика и фармакогенетика — выявление мутаций, определяющих предрасположенность к тромбофилии и влияющих на назначение варфарина
- Ветеринария — определение возбудителей, являющихся причиной аборта КРС